Sry基因的克隆及其在HeLa细胞中的表达

• 作者: 余秀琴 廖尚英 张衍泉 朱宝长 王丽莉
• 来源期刊: 首都师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: Sry基因 质粒构建 真核表达
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 页码范围: 36-41
• 页数: 6页
• 分类号: Q785
• 字数: 4275字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-9398.2008.04.010

摘要

目的:构建真核表达重组质粒pCR3.1-Sry.并检验其在真核细胞内的表达.方法:用PCR法从小鼠基因组中扩增出Sty全长基因,重组入pMD18-T载体,酶切鉴定重组质粒,对酶切正确的重组质粒测序.双酶切测序验证的重组质粒.将切下的片段与真核表达质粒pCR3.1相连构建pCR3.1-Sty重组质粒.将其转染HeLa细胞后,RT-PCR法检测重组质粒在细胞中mRNA的转录;免疫荧光法检测重组质粒在细胞中蛋白质的表达.结果:PCR法扩增得到了1.2 kb的特异性Sry基因片段;成功地构建了真核表达重组质粒pCR3.1-Sry;重组质粒pCR3.1-Sry在HeLa细胞中mRNA及蛋白水平均可检测到表达.结论:重组质粒构建成功并可以在体外真核细胞中表达,为进一步研究其作为核酸疫茁的免疫作用提供了可控的实验材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱宝长	首都师范大学生命科学院	38	146	7.0	10.0
2	王丽莉	首都师范大学生命科学院	2	0	0.0	0.0
3	张衍泉	首都师范大学生命科学院	3	7	1.0	2.0
4	廖尚英	中国科学院动物研究所	3	9	1.0	3.0
5	余秀琴	首都师范大学生命科学院	2	7	1.0	2.0