hGR小基因真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达

• 作者: 刘荣玉 唐辰虹 喻志强
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 受体,糖皮质激素 基因 HeLa细胞 真核表达
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 1660-1664
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 2749字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2006.08.048

摘要

目的:构建用于体内剪接分析的人糖皮质激素受体(hGR)小基因真核表达载体.方法:以人基因组DNA为模板,设计特定的引物进行PCR扩增获得3.892 kb长的hGR小基因片段,并将其连入pMD18-TSimple载体中,限制性内切酶酶切鉴定后,再亚克隆到PcDNA3载体中,获得hGR小基因真核表达质粒PcDNA3-hGR并测序验证.Lipofectamine法转染PcDNA3-hGR至HeLa细胞,RT-PCR检测hGR小基因剪接异构体hGRα and hGRβ mRNA的表达.结果:限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实克隆片段序列与GenBank目标序列一致;PcDNA3-hGR在HeLa细胞内成功表达剪接异构体hGRα和hGRβ.结论:hGR小基因真核表达载体构建成功,为进一步研究糖皮质激素受体基因外显子9的选择性剪接提供了细胞分子模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘荣玉	安徽医科大学第一附属医院干部呼吸内科	62	407	11.0	16.0
2	喻志强	中国科学技术大学生命科学院实验中心	2	0	0.0	0.0
3	唐辰虹	安徽医科大学第一附属医院干部呼吸内科	2	4	1.0	2.0