可溶性mPDL1-hIgGFc表达载体构建、表达及对诱导细胞增殖与凋亡的影响

• 作者: 何峰蓉 吴雄文 周玮 廖雯君 张金元 戴红 朱惠芬 杨敬 沈关心 王国华
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠PDL1 混合淋巴细胞培养 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2008,（9）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 795-798
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3105字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0254-5101.2008.09.007

摘要

目的 可溶性mPDL1-hIgGFc(mouse PDL1-human IgG Fc)表达载体的构建与表达,及其对诱导细胞增殖与凋亡的研究.方法 以含有mPDL1基因的载体pmPDL1为模板,采用PCR的方法获得mPDL1胞外段基因,定向连接于含有hlgGFc基因片段的载体phIgGFc,构建表达载体pmPDL1-hIgGFc;采用脂质体将重组子转染CHO细胞,转染后的CHO命名为cHOp;ELISA和Western blot法检测目的 蛋白的表达,流式细胞术检测CHOp培养上清对混合淋巴细胞培养(MLC)的影响.结果 测序结果和酶切鉴定显示构建的表达载体pmPDL1-higGFc完全正确;ELISA和Westernblot法检测CHOp培养上清中有目的 蛋白表达;流式细胞术检测表明CHOp培养上清可体外抑制小鼠MLG,并诱导活化T细胞凋亡,其效应呈剂量依赖性.结论 成功构建mPDL1-hIgGFc表达载体;mPDL1-hIgGFc在体外可抑制MLC和诱导活化T细胞凋亡,具有负性调节T细胞的功能.