日本血吸虫Tsunagi蛋白基因的获得、表达及初步鉴定

• 作者: 刘淼 朱绍春 沈际佳 王晓楠 赵志荣 雷黎
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 Tsunagi 克隆 基因表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 120-124
• 页数: 5页
• 分类号: R383.24
• 字数: 4887字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.02.007

摘要

目的 获得日本血吸虫Tsunagi蛋白基因的cDNA序列,克隆、表达和纯化原核蛋白并初步鉴定.方法 应用简并引物PCR和5'端、3'端锚定PCR,扩增得到日本血吸虫Tsunagi基因的完整开放阅读框(Open reading frame, ORF).将该基因亚克隆入原核表达载体pET28a(+),诱导表达并纯化融合蛋白.用纯化后的蛋白免疫小鼠,制备该蛋白的多克隆抗体,分别用ELISA和Western Blotting对表达蛋白进行初步鉴定.结果 获得日本血吸虫Tsunagi蛋白基因的完整ORF,序列全长为531bp,编码177个氨基酸.构建的重组质粒pET28a-SjTsunagi在大肠杆菌中获得了可溶性表达;以重组蛋白免疫小鼠获得效价为1∶51 200的多克隆抗体,Western Blotting证实抗体可特异性识别目的 蛋白.结论 成功获得日本血吸虫Tsunagi蛋白编码基因的全长ORF,在大肠杆菌中克隆表达了Tsunagi基因,并制备了特异性多克隆抗体,为进一步研究其在日本血吸虫生殖生物学中的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈际佳	安徽医科大学病原生物学教研室	84	364	10.0	14.0
2	刘淼	安徽医科大学病原生物学教研室	39	98	6.0	7.0
3	王晓楠	安徽医科大学病原生物学教研室	29	108	6.0	8.0
4	朱绍春	安徽医科大学病原生物学教研室	10	46	4.0	5.0
5	赵志荣	安徽医科大学病原生物学教研室	7	33	4.0	5.0
6	雷黎	安徽医科大学病原生物学教研室	8	32	4.0	5.0