日本血吸虫Nanos样蛋白基因的获得、表达及初步鉴定

• 作者: 任翠平 刘淼 沈际佳 赵前峰 陈红霞
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 Nanos样蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1109-1113
• 分类号: R383.24
• 字数: 4566字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2011.11.001

摘要

目的 获得日本血吸虫Nanos样蛋白基因的cDNA 序列,克隆、表达和纯化原核蛋白并初步鉴定.方法 应用PCR法扩增获得日本血吸虫Nanos样基因的完整开放阅读框(ORF),将该基因亚克隆到原核表达载体pET28a(+),诱导表达并纯化融合蛋白.用纯化后的蛋白免疫家兔,制备该蛋白的多克隆抗体,分别用 ELISA 和 Western blot法对表达蛋白进行初步鉴定.结果 该基因为日本血吸虫的一个新基因,其编码序列的ORF为672 bp,编码 223个氨基酸,理论相对分子量为25 ku;半定量RT-PCR技术分析显示该基因在日本血吸虫的虫卵及各期虫体有不同的表达量;成功构建了该基因的重组表达质粒pET28a(+)-SjNanos,并在大肠埃希菌中获得表达,Western blot分析表明该重组蛋白具有较好的免疫原性.结论 获得日本血吸虫Nanos 蛋白编码基因的全长ORF,在大肠杆菌中克隆表达了日本血吸虫Nanos样基因,并制备了特异性多克隆抗体,为进一步研究其在日本血吸虫生殖生物学中的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈际佳	安徽医科大学病原生物学教研室	84	364	10.0	14.0
2	刘淼	安徽医科大学病原生物学教研室	39	98	6.0	7.0
3	赵前峰	安徽医科大学病原生物学教研室	2	1	1.0	1.0
4	陈红霞	安徽医科大学病原生物学教研室	3	1	1.0	1.0
5	任翠平	安徽医科大学病原生物学教研室	24	96	6.0	9.0