人SNAP25基因重组腺病毒的构建与表达

• 作者: 何燕 刘芬 庄国庆 王嵬 王有利 马军丽
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: SNAP25 重组 腺病毒 载体 人胚肾293A细胞
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 18-22
• 页数: 5页
• 分类号: Q784
• 字数: 4106字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2008.10.005

摘要

利用RT-PCR法,从人胰腺组织扩增出SNAP25基因,定向克隆至pENTR-TOPO载体获得重组质粒pENTR/D-TOPO-SNAP25.经PCR及测序验证其阅读框正确.再与腺病毒载体pAD/CMV/V5-DEST 发生LR重组反应,SNAP25取代pAD/CMV/V5-DESTTM中的ccdB-CmR基因,获得重组腺病毒载体pAD/CMV/V5-DEST-SNAP25(pAD- SNAP25).重组腺病毒载体经Pac I酶切,脂质体法转染HEK-293A细胞.以鼠抗人SNAP25单克隆抗体为一抗,做荧光及Western blot检测,结果表明重组腺病毒pAD-SNAP25在HEK-293A细胞中包装成功.重组腺病毒pAD-SNAP25感染大鼠胰岛,结果表明在高糖浓度下,外源性SNAP25蛋白的表达促进了大鼠胰岛素分泌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王嵬	中国科学院研究生院生命科学院	58	639	15.0	22.0
3	庄国庆	中国科学院研究生院生命科学院	1	0	0.0	0.0
4	王有利		9	132	4.0	9.0
5	马军丽	首都医科大学公共卫生与家庭医学学院	4	2	1.0	1.0
6	刘芬	首都医科大学公共卫生与家庭医学学院	36	214	9.0	12.0
9	何燕	首都医科大学公共卫生与家庭医学学院	37	200	8.0	12.0