实时荧光定量PCR检测RAGE mRNA方法的建立及初步应用

• 作者: 张志泉 景蓉蓉 王惠民 祝文彩 鞠少卿
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 晚期糖基化终末产物受体 实时荧光定量PCR 食管癌
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 55-58
• 页数: 4页
• 分类号: Q781
• 字数: 3033字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)检测人晚期糖基化终末产物受体(RAGE)mRNA的方法并研究其在食管癌组织中的表达.方法 根据Genebank提供的序列在RAGE基因外显子5和6之间设计引物,应用SYBR Green Ⅰ荧光染料,建立检测RAGE mRNA的RTFQ-PCR方法,并对其线性、特异性、灵敏度及重复性进行评价;根据标准曲线计算出食管癌及配对远端正常组织中RAGE mRNA含量,并以RAGE mRNA和18S rRNA含量的比值作为评价RAGE mRNA表达水平指标.结果 线性范围为5.0×103～5.0×109copies/ml,相关系数为-0.98,批内变异系数(CV)为0.63%～8.71%,批间CV为1.52%～12.38%.食管癌及配对远端正常组织RAGE mRNA与18S rRNA浓度的对数比值(-x±s)分别为0.638±0.068和0.334±0.329(P＜0.005),提示食管癌组织RAGE表达上调.结论 RTFQ-PCR检测RAGE mRNA的方法具有灵敏、特异、重复性好等优点,RAGE mRNA表达水平与食管癌存在一定相关性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王惠民	南通大学附属医院南通大学公共卫生学院	188	712	11.0	17.0
2	鞠少卿	南通大学附属医院南通大学公共卫生学院	157	477	10.0	13.0
3	祝文彩	南通大学附属医院南通大学公共卫生学院	21	74	4.0	7.0
4	张志泉	南通大学附属医院南通大学公共卫生学院	39	79	5.0	7.0
5	景蓉蓉	南通大学附属医院南通大学公共卫生学院	33	106	6.0	7.0