长心卡帕藻RAPD-PCR反应体系的正交优化研究

• 作者: 何培民 应成琦 张婷 赵素芬
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 长心卡帕藻 DNA提取 随机扩增DNA多态性 反应体系
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 161-165
• 页数: 5页
• 字数: 3294字
• 语种: 中文

摘要

采用SDS(十二烷基硫酸钠,20%)法提取了大型海藻长心卡帕藻(Kappaphycus alvarezii)基因组DNA.通过单因子梯度试验,确定了影响随机扩增DNA多态性(RAPD)扩增结果的模板、Mg2+、dNTPs、S22引物、Taq的适宜浓度、退火温度和反应的最佳循环次数;利用正交试验优化了模板、Mg2+、dNTPs、S22引物、Taq的配比浓度.结果表明,在进行长心卡帕藻的RAPD扩增时,在总体积为25μl的反应体系中,模板、Mg2+、dNTPs、S22引物、Taq的最佳浓度分别为15ng、2.0mmol/L、0.2mmol/L、0.25μmol/L、2.5U;退火温度为37℃.反应程序为94℃预变性5min,然后经94℃变性30s、37℃退火1min.72℃延伸2min,进行30次循环,最后在72℃再延伸10min.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何培民	上海水产大学生命科学与技术学院	48	967	19.0	28.0
2	赵素芬	上海水产大学生命科学与技术学院	2	16	2.0	2.0
6	张婷	上海水产大学生命科学与技术学院	2	9	1.0	2.0
7	应成琦	上海水产大学生命科学与技术学院	1	9	1.0	1.0