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摘要:
目的 探讨ITS1-5.8S rDNA-ITS2巢式PCR检测卡氏肺孢子虫的应用价值并测定其基因序列.方法 采用地塞米松免疫抑制法诱导SD大鼠感染肺孢子虫;制作肺印片、肺组织匀浆液及支气管肺泡灌洗液(BAL)涂片进行六亚甲基四胺银(GMS)染色镜检;提取肺孢子虫DNA进行巢式PCR扩增,测序后与GenBank的不同宿丰肺孢子虫相关序列进行比较分析.结果 用ITS1-5.8S rDNA-ITS2巢式PCR法均能检测出实验感染大鼠BAL和肺组织卡氏肺孢子虫DNA,阳性率为100%(10/10),比较BAL标本、肺印片和肺组织匀浆液GMS染色法的检出效率,BAL最低,肺组织匀浆液最高.其中20%(2/10)大鼠的BAL标本用GMS染色法未能检测出,但用巢式PCR方法 均能成功扩增;所测SD大鼠卡氏肺孢子虫ITS1-5.8S rDNA-ITS2基因序列长度为516bp,ITS1、5.8S rDNA、ITS2基因片段分别为198、158、160bp,与GenBank的大鼠(L27658)、小鼠(AY532651)和长爪沙鼠(AY875972)的ITS1-5.8S rDNA-ITS2基因的同源性分别为96%(452/467)、88%(275/310)、95%(152/159),其变异位点多在ITS1和ITS2基因片段.结论 ITS1-5.8S rDNA-ITS2巢式PCR检测卡氏肺孢子虫敏感性高、特异性强,可作为早期诊断肺孢子虫肺炎方法,特别适用无创性标本的检测;成功获取SD大鼠卡氏肺孢子虫ITS1-5.8S rDNA-ITS2的基冈序列,与不同宿主比较其5.8S rDNA较保守,ITS1和ITS2基因变异较大,适合基因分型和系统进化研究.
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文献信息
篇名 大鼠卡氏肺孢子虫ITS 1-5.8S rDNA-ITS2的巢式PCR检测及基因序列的测定
来源期刊 应用预防医学 学科 医学
关键词 卡氏肺孢子虫 内转录问隔区(ITS) 5.8S核糖体RNA基因(5.8S rDNA) 巢式PCR
年,卷(期) 2008,(5) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 257-262
页数 6页 分类号 R382.3
字数 2533字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1673-758X.2008.05.001
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 黎学铭 57 261 9.0 13.0
2 江河 32 134 6.0 8.0
3 林睿 29 156 7.0 11.0
4 赵同领 2 3 1.0 1.0
5 张鸿满 48 248 9.0 12.0
6 张陆娟 18 45 4.0 5.0
7 欧阳颐 31 111 5.0 9.0
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研究主题发展历程
节点文献
卡氏肺孢子虫
内转录问隔区(ITS)
5.8S核糖体RNA基因(5.8S rDNA)
巢式PCR
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
应用预防医学
双月刊
1673-758X
45-1345/R
大16开
广西省南宁市金洲路18号
1995
chi
出版文献量(篇)
4183
总下载数(次)
2
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