鹅源新城疫病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 丁壮 刘新鑫 刘美 吴昊 尹仁福
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鹅源新城疫病毒 实时荧光定量PCR 快速诊断
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 320-322
• 页数: 3页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 2390字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2008.04.010

摘要

根据GenBank上鹅源新城疫病毒NA-1株M基因的序列,在保守区域设计并合成了1对引物,采用荧光嵌合法(SYBR Green Ⅰ)建立了检测鹅源新城疫病毒的实时荧光定量PCR(real-time PCR).以鹅源新城疫病毒NA-1株反转录产物cDNA为标准品,通过优化反应条件,建立了标准曲线,并进行了融解曲线分析.结果,标准曲线的Ct值检测范围为23～36,相关系数(r2)为0.992;无引物二聚体及非特异性产物,且Tm=(83±0)℃.结果表明,建立的检测鹅源新城疫病毒实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏性高,能为以后快速诊断鹅源新城疫病毒提供有效保障.