FcεR Ⅰ受体α亚基的重组表达、单克隆抗体的制备及特异性鉴定

• 作者: 宋晓妮 曲焕 王文敬 王穗海 王萍 董文其 魏伟
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: IgE FcεRⅠα亚基 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 416-419
• 页数: 5页
• 分类号: R392
• 字数: 3922字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2008.05.004

摘要

目的 通过基因重组的方法表达IgE高亲和力受体FeεR Ⅰα亚基,并用重组蛋白制备单克隆抗体.方法 用RT-PCR的方法从过敏性疾病病人外周血嗜碱性粒细胞调取FcεR Ⅰα蛋白基因,经T-A克隆、亚克隆至pET28a(+)原核表达载体,将重组质粒转化到大肠杆菌BL-21-STAR(DE3),IPTG诱导表达FeεR Ⅰα亚基蛋白,通过Ni-NTA亲和层析纯化融合蛋白;并用其免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗FcεR Ⅰα亚基单克隆抗体,用细胞免疫荧光法对单克隆抗体的特异性进行鉴定.结果 成功调取了人IgE高亲和力受体FcεRⅠα亚基的基因,且测序正确;构建原核表达质粒FcεR Ⅰα-pET28a(+);成功建立4株稳定分泌抗FcεR Ⅰα亚基的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为G101、C22、G113、G42.通过细胞免疫荧光实验证实,4株单克隆抗体均能特异性结合人嗜碱性粒细胞表面的FcεR Ⅰα亚基.结论 成功利用基因重组技术制备了FcεR Ⅰα亚基蛋白,制备了4株效价高、特异性好的抗FcεR Ⅰα亚基单克隆抗体,为FeεR Ⅰα亚基及其抗体在过敏性疾病中的生物学功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王穗海	南方医科大学生物技术学院生物制药系	33	92	5.0	7.0
2	董文其	南方医科大学生物技术学院生物制药系	43	142	6.0	9.0
3	宋晓妮	南方医科大学生物技术学院生物制药系	3	10	1.0	3.0
4	王文敬	南方医科大学生物技术学院生物制药系	47	192	7.0	11.0
5	魏伟	南方医科大学生物技术学院生物制药系	10	64	3.0	8.0
6	曲焕	南方医科大学生物技术学院生物制药系	1	1	1.0	1.0
7	王萍	南方医科大学生物技术学院生物制药系	25	53	5.0	6.0