小鼠Rnf141多克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 宋红霞 张思仲 杨季云
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: Rnf141 融合蛋白 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 697-700
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2998字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2008.05.001

摘要

目的 获得小鼠Rnf141多克隆抗体,并对其功能进行初步研究.方法 利用多聚酶链反应(PCR)扩增获得鼠Rnf141基因并且与原核表达载体pGEX-5X-3(含GST标签)进行重组,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),经1 mmol/L IPTG在25 ℃条件下诱导,用SDS-PAGE检测,获得GST-Rnf141融合蛋白高效表达后,通过Glutathione Sephorase 4B纯化.纯化的融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,通过Western blot和免疫组织化学的方法检测抗体的特异性.结果 成功构建了重组质粒pGEX-Rnf141,该质粒能在大肠杆菌BL21(DE3)中表达融合蛋白GST-Rnf141,融合蛋白表达量约占细菌总蛋白的46%,制备的多抗效价达1∶128000,它可以与GST-Rnf141重组蛋白和小鼠不同脏器组织Rnf141蛋白发生特异的抗原抗体反应,在脾脏和脑组织中Rnf141蛋白表达量较高.结论 成功制备小鼠Rnf141多克隆抗体,该抗体为研究Rnf141的表达与功能提供了有用的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张思仲	四川大学华西医院医学遗传学研究室	49	411	10.0	18.0
2	宋红霞	四川大学华西医院医学遗传学研究室	5	9	2.0	3.0
3	杨季云	四川大学华西医院医学遗传学研究室	2	4	2.0	2.0