用线性载体稳定转染P815细胞的脂质体转染方法的优化

• 作者: 于永利 吴秀丽 尹晓光 王丽颖 王华 王莉
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 脂质体 稳定转染 绿色荧光蛋白 线性化载体
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 技术交流
• 页码范围: 721-724,封3
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:提高用线性载体进行的稳定转染哺乳动物细胞的脂质体转染方法的转染效率及转染稳定性.方法:将pcDNA3/GFP载体线性化,对复苏24 h的P815细胞(10%铺满培养板板底)在96孔板上进行转染,优化DNA、脂质体的用量以及G418筛选浓度,设立复苏后培养1周的P815细胞(80%铺满培养板板底)在6孔板上进行常规转染条件的对照.用共聚焦荧光显微镜和流式细胞术检测阳性克隆.结果:采用优化的方法可将用线性化的pcDNA3/GFP质粒稳定转染P815细胞的实验周期由2个月缩短为2周,转染细胞株中GFP+细胞的比例、GFP的荧光强度、转染细胞的稳定性均显著高于常规方法所获得的转染细胞.结论:改进的脂质体转染方法能显著提高用线性载体进行的细胞转染的效率和稳定性,并能显著缩短实验周期.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于永利	吉林大学基础医学院免疫学教研室	86	281	8.0	12.0
2	王丽颖	吉林大学基础医学院分子生物学教研室	82	282	9.0	13.0
3	王莉	吉林大学基础医学院免疫学教研室	90	378	11.0	16.0
4	王华	吉林大学基础医学院分子生物学教研室	63	470	10.0	20.0
5	尹晓光	吉林大学基础医学院免疫学教研室	6	22	2.0	4.0
6	吴秀丽	吉林大学基础医学院分子生物学教研室	27	81	4.0	8.0