抗Ⅳ型胶原酶抗体Fv片段与力达霉素融合蛋白的免疫活性

• 作者: 李亮 甄永苏 蔡琳 郭效忠 高瑞娟
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Ⅳ犁胶原酶 免疫活性 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 35-39,143
• 页数: 6页
• 分类号: R9
• 字数: 4520字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-548X.2008.11.012

摘要

目的 融合蛋白Fv-LDP是通过基因工程方法制备,其抗体部分为抗Ⅳ型胶原酶抗体3G11的单链抗体scFv,相当于"弹头"的载体部分为力达霉素辅基蛋白LDP.本实验研究了融合蛋白Fv-LDP的免疫学活性.方法 采用间接ELISA方法和免疫细胞荧光方法检测融合蛋白Fv-LDP的免疫学活性,明胶酶谱实验观察融合蛋白Fv-LDP对肿瘤细胞分泌明胶酶的影响,重组基膜侵袭实验分析融合蛋白Fv-LDP对肿瘤细胞侵袭能力的影响,通过制备兔抗Fv-LDP多抗,应用免疫组织化学技术检测融合蛋白Fv-LDP与人乳腺癌组织的免疫反应性.结果 融合蛋白Fv-LDP与Ⅳ型胶原酶、纤维肉瘤HT-1080细胞、结肠癌HT-29细胞、肺癌PG细胞等均具有免疫反应性,3种细胞中以HT-1080细胞的相对亲和力最高,其次是PG细胞,HT-29细胞.免疫细胞荧光结果显示,肿瘤细胞HT-1080胞质着绿色荧光,表明融合蛋白Fv-LDP结合于肿瘤细胞的胞质部位.融合蛋白Fv-LDP可有效抑制肿瘤细胞分泌明胶酶,可明显抑制肿瘤细胞对人工基膜的侵袭,并呈剂量依赖性.人乳腺癌组织免疫组化结果显示,融合蛋白Fv-LDP与乳腺痛癌细胞胞质部位结合,阳性着色部位与MMP-9抗体的染色一致.结论 融合蛋白Fv-LDP基本保留了完整单抗3G11对明胶酶的免疫活性,又囚其携带有"弹头"的载体蛋白LDP,可以用烯二炔发色团进行强化,因此,有可能用于制备抗肿瘤抗体药物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭效忠	河北省沧州市中心医院病理科	12	23	3.0	4.0