产A型肠毒素金黄色葡萄球菌的筛选及其重组表达

• 作者: 吴双 张仁利 耿艺介 胡章立 高世同
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌A型肠毒素 重组表达 蛋白纯化 复性
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 451-454
• 页数: 4页
• 分类号: R378.1
• 字数: 3916字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.05.015

摘要

目的 分离产A型肠毒素金黄色葡萄球菌标准株,克隆和表达金黄色葡萄球菌肠毒素A (SEA),研究其生物学特征.方法 应用PCR扩增SEA基因片段,与克隆载体pGEM T-easy连接,亚克隆到表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21 (DE3),经诱导表达和纯化重组蛋白,用重组蛋白免疫小鼠获得抗血清,进行重组蛋白免疫原性分析.结果 成功克隆SEA全长基因,经DNA序列分析证实与GenBank收录序列具有100%的同源性.表达蛋白相对分子质量为31 000,以包涵体形式存在.纯化、复性后获得有活性的rSEA蛋白,rSEA蛋白能够识别天然的SEA.结论 SEA基因成功克隆到表达质粒内并表达,rSEA具备抗原性,为制备单抗、诊断试剂及金黄色葡萄球菌致病机制研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张仁利		192	798	13.0	17.0
5	耿艺介		105	506	11.0	15.0
6	高世同		137	593	11.0	15.0
7	胡章立	深圳大学生命科学学院	68	500	13.0	18.0
8	吴双		16	55	4.0	6.0