PTD-Lmp-3融合蛋白的纯化、表达和鉴定

• 作者: 周跃 李长青 贺伟峰 郑文杰
• 来源期刊: 实用预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白质转导域 LIM矿化蛋白 融合蛋白 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 370-373
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 3488字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3110.2008.02.025

摘要

目的 构建融合蛋白PTD-Lmp-3的表达质粒,并进行诱导表达、纯化及鉴定.方法 利用基因重组技术构建pET43.1a-PTD-Lmp-3融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达融合蛋白,经Ni2+-NTA层析纯化,SDS-PAGE和Westcrn blot鉴定目的 蛋白.结果 成功构建了表达质粒pET43.1a-PTD-Lmp-3,表达的融合蛋白经SDS-PAGE分析,经IPTG诱导表达的总菌体蛋白在融合蛋白的相应位置PTD-LMP-3约为22 kD,可溶性分析发现融合蛋白主要以上清形式存在,纯化后得到了目的蛋白.Western blot鉴定显示表达蛋白具有抗原性.结论 成功构建了PTD-Lmp-3的重组表达载体,使融合蛋白在大肠埃希菌BL21(DE3)中高败表达,亲和层析后获得了纯化目的蛋白,为进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺伟峰	第三军医大学西南医院烧伤研究所	32	188	7.0	12.0
2	周跃		354	4854	36.0	56.0
3	李长青		150	3060	30.0	51.0
4	郑文杰		45	1306	16.0	36.0