PTD-mLumin-HMGB1 A原核蛋白的表达、纯化及初步鉴定

• 作者: 刘月芳 吉滢 曾子涵 殷丝雨 田伊卿 邵启祥 高升
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白转导结构域 高迁移率族蛋白1 融合蛋白 mLumin
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 461-464
• 页数: 4页
• 分类号: R393
• 字数: 3273字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建含有蛋白转导结构域(protein transduction domain,PTD)和荧光蛋白mLumin的人HMGB1 A盒原核表达载体,表达并纯化PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白.方法:利用基因重组技术构建pET28a-PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白原核表达载体,并在大肠埃希菌Rosette(DE3)中表达融合蛋白,经Ni2+分离柱纯化PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白,激光共聚焦显微镜观察其穿膜能力.结果:成功构建了PTD-mLumin-HMGB1 A原核表达载体,并表达和纯化了PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白,该融合蛋白能高效地穿过细胞膜进入细胞内.结论:成功地表达和纯化了PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白,此融合蛋白具有良好的穿膜能力,为更好地研究HMGB1 A的细胞内定位和体内定位提供了重要的依据.