日本脑炎病毒非结构蛋白NS5对IFN-α介导的信号转导通路的抑制作用

• 作者: 于学东 姜涛 李晓峰 秦成峰 秦鄂德 赵慧 邓永强 陈水平 韩剑峰
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 干扰素I型 JAK-STAT信号转导通路 脑炎病毒 日本 病毒非结构蛋白质类
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 811-815
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 字数: 3942字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2008.07.010

摘要

目的 探讨日本脑炎病毒抑制IFN-α介导的JAK-STAT信号转导通路过程中发挥关键作用的病毒特异蛋白,为阐明日本脑炎病毒抑制Ⅰ型IFN介导的JAK-STAT信号转导通路的作用机制奠定基础.方法 分别构建日本脑炎病毒编码的7种非结构蛋白基因(NS1,NS2A,NS2B,NS3,NS4A,NS4B和NS5)的重组真核表达载体.采用间接免疫荧光法和Western blotting观察它们在细胞内的表达及定位情况.利用含萤火虫荧光素酶(Luc)报告基因的重组载体pISRE-Luc,观察表达病毒不同非结构蛋白的细胞内IFN-α介导的JAK-STAT信号转导通路的活化程度.构建融合表达红色荧光蛋白的STAT 1重组真核表达载体pRed-STAT 1,利用该重组载体在表达病毒非结构蛋白的细胞内观察融合蛋白Red-STAT 1在IFN-α作用下的细胞内定位情况.同时,对表达病毒非结构蛋白的细胞内IFN-α介导的STAT 1分子的磷酸化水平进行检测.结果 日本脑炎病毒的7种非结构蛋白均可在哺乳动物细胞内正确表达,而且表达蛋白均位于细胞质中.在这7种非结构蛋白中,NS5可阻断STAT 1分子的核转运及抑制STAT 1分子的磷酸化水平,从而抑制IFN-α介导的细胞内JAK-STAT信号转导通路的活化.结论 日本脑炎病毒的非结构蛋白NS5棚IFN系统的信号转导通路具有显著的抑制作用,可能是一种Ⅰ型IFN系统的拮抗蛋白.