乙型脑炎病毒NS5蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备

• 作者: 周希珍 宗静 李晓峰 秦成峰 秦鄂德 赵慧 高岚
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型脑炎病毒 非结构蛋白NS5 病毒非结构蛋白质类 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 255-257
• 分类号: R34
• 字数: 3572字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2010.03.015

摘要

目的 表达纯化乙型脑炎病毒非结构蛋白NS5,并制备其多克隆抗体.方法 通过PCR法扩增编码NS5蛋白的全长基因,将其克隆到原核表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,并通过Ni柱亲和层析纯化重组蛋白.用纯化后的重组蛋白免疫BALB/c鼠制备多克隆抗体.采用间接免疫荧光法检测抗体效价,Western印迹鉴定抗体的特异性.结果 与结论 成功获得了可溶性表达的NS5蛋白,制备了多克隆抗体,效价为1∶1000,能够特异性识别乙型脑炎病毒感染细胞中表达的NS5蛋白,为进一步研究NS5蛋白的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦鄂德	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	75	476	11.0	17.0
2	高岚	兰州大学生命科学学院	30	417	9.0	20.0
3	周希珍	兰州大学生命科学学院	2	28	2.0	2.0
4	赵慧	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	10	53	4.0	7.0
5	宗静		12	51	4.0	6.0
6	李晓峰	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	10	49	4.0	6.0