重组融合蛋白rTMP-GH在巴斯德毕赤酵母中表达的研究

• 作者: 开丽 王军平 王崧 王艾平 申明强 粟永萍 许杨 陈芳 陈默
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: rTMP-GH 毕赤酵母 表达
• 年，卷（期）: 2008,（21）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2037-2040
• 页数: 4页
• 分类号: Q513|Q949.326.1|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2008.21.017

摘要

目的 实现TPO模拟肽(thrombopoietin mimetic peptide,TMP)与人生长激素(human growth hormone,hGH)的重组融合蛋白rTMP-GH在巴氏毕赤酵母中的高效表达.方法 以含有rTMP-GH核苷酸序列的原核质粒为模板,PCR方法获得rTMP-GH的编码序列,并亚克降至载体pPIC9K中,将所构建pPIC9K-rTMP-GH表达质粒转化酵母宿主细胞GS115,MD/MM平板及G418抗性筛选高表达株,然后进行试管补料分批表达,Western blot对表达产物进行鉴定,通过巨核细胞集落形成能力对其,圭物学活性进行初步检测.结果 成功构建pPIC9K-rTMP-GH表达质粒,筛选到高表达rTMP-GH重组融合蛋白的巴氏毕赤酵母细胞株,初步证实所表达产物具有刺激巨核细胞集落形成的能力.结论 成功实现了rTMP-GH融合蛋白在巴氏毕赤酵母中的高效表达.