酵母双杂交技术对人胰腺cDNA文库中HBcAg结合蛋白基因的筛选

• 作者: 张晨宇 张维燕 张锦前 成军 李国力 杨涤 王晓春 王琦
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HBcAg 人胰腺cDNA文库 酵母双杂交技术
• 年，卷（期）: 2008,（16）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1746-1750
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 5128字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2008.16.007

摘要

目的: 应用酵母双杂交技术,筛选人胰腺cDNA文库中与HBV核心抗原结合的蛋白的基因.方法:扩增人胰腺cDNA文库并纯化鉴定,将其转化至酵母菌Y187;诱饵质粒pGBKT7-HbcAg转化酵母菌AH109并筛选鉴定.应用酵母双杂交系统3进行配合,在SD/-Trp/Leu-His/-Ade培养基和含X-gal的SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade培养基上进行双重筛选,提取阳性酵母菌落的质粒转化大肠埃希菌DH5α,提取质粒并测序,对测序结果进行生物信息学分析.结果:人胰腺cDNA文库的构建以及pGBKT7-HBcAg质粒转化AH109酵母菌株均获成功,并从人胰腺cDNA文库中筛选出9个与HBcAg蛋白相结合的蛋白基因.分别与以下已知的9种编码蛋白基因序列同源:人胰脂肪酶(PNLIP)、人胆盐刺激酯酶(CEL)、人胰凝乳蛋白C(CTRC)、人胰蛋白酶原、人羧肽酶B1(CPB1)、人线粒体全基因组、人胰弹性酶2A、人辅脂肪酶(CLPS)和人核糖体蛋白(RPL10A).结论:筛选出的与HBcAg蛋白相结合的蛋白基因主要与胰腺外分泌功能相关,HBV感染可能通过与胰腺所分泌的糖、脂类代谢相关的酶类结合,而引发代谢性疾病.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	成军	北京地坛医院传染病研究所	210	843	13.0	20.0
2	杨涤	北京地坛医院传染病研究所	6	14	2.0	3.0
3	王琦	北京地坛医院传染病研究所	29	36	3.0	4.0
4	张维燕	北京地坛医院传染病研究所	9	65	4.0	8.0
5	张锦前	北京地坛医院传染病研究所	20	80	5.0	8.0
6	李国力	北京地坛医院传染病研究所	11	29	2.0	5.0
7	张晨宇	北京地坛医院传染病研究所	5	33	4.0	5.0
8	王晓春	北京地坛医院传染病研究所	2	11	1.0	2.0