再生丝素膜对Ad-VEGF165转基因成纤维细胞基因表达的影响

• 作者: 井茕莹 刘铁连 单云波 杨吉成 盛伟华 缪竞成 胡志清 谢宇锋 贾红亮
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 再生丝素膜 血管内皮生长因子 腺病毒 转基因 生物材料
• 年，卷（期）: 2008,（36）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 7187-7190
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 1178字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.36.033

摘要

背景:前期实验已证实再生丝素膜可促进pcDNA3.0-VEGF165转染的L929细胞表达血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF).目的:进一步观察再生丝素膜对经腺病毒介导的人VEGF(Ad-VEGF165)转基因成纤维细胞基因转录表达的影响.设计、时间及地点:对比观察细胞基因工程实验,于2007 11/2008-04在苏州大学细胞与分子生物实验室完成.材料:再生丝素膜由苏州大学材料工程学院李明忠教授提供.方法:将Ad-VEGF165腺病毒感染培养在再生丝素膜、聚氯乙烯膜及聚乙烯膜卜的QBI-293A人胚肾和WI-38人胚肺成纤维细胞,以空载体Ad-GFP腺病毒和未接种病毒的PBS组为对照.主要观察指标:通过实时定量RT-PCR法检测不同材料对成纤维细胞VEGF mRNA转录的影响;ELISA法检测其埘VEGF、血管生成素1、碱性成纤维细胞生长因子、血小板衍化生长因子表达的影响.结果:再生丝素膜组成纤维细胞VEGF mRNA呈高水平表达,但聚氯乙烯膜组转录水甲明显下降(p<0.05).再生丝素膜组Ad-VEGF165转基因293A细胞及WI-38细胞小仅日的基因VEGF细胞因子的分泌旱高水平表达,并可促使血管生成素1基因表达水平明显提高(P<0.05),而R再生丝素膜还可使成纤维细胞自身分泌的碱性成纤维细胞生长因子、血小板衍化生长因子呈现正常表达水平.结论:再生丝索膜不仪利于VEGF目的基因在成纤维细胞中呈现高效表达,并促进血管生成素1基因的表达,而且能维持成纤维细胞自身分泌的与组织损伤修复相关基因碱性成纤维细胞生长因子、血小板衍化生长因子的正常表达.