趋化因子RANTES在毕赤酵母中的表达、纯化与鉴定

• 作者: 张宁 胡宗利 赵志平 邓晓洁 陈国平
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: RANTEs 毕赤酵母 分泌 基因表达
• 年，卷（期）: 2008,（40）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 7884-7887
• 页数: 4页
• 分类号: R341
• 字数: 5033字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.40.029

摘要

背景:RANTES是典型的趋化性细胞因子,参与很多炎症反应以及器官移植免疫排斥反应.从天然组织中分离RANTES数量有限,难以满足对其生物学功能研究和临床应用的需要;运用基因工程方法生产RANTES具有一定的应用价值.目的:观察人体趋化因子RANTES基因在毕赤酵母体系中的分泌表达,获得重组RANTES蛋白.设计、时间及地点:基因水平的实验观察,于2006-07/2007-10在重庆大学生物工程学院313实验审完成.材料:新鲜人外周血取自志愿者,用以分析人体RANTES基因序列设计引物;质粒pPIC9K、毕赤酵母菌珠Pichia Pastoris GSll5均由重庆大学生物工程学院313实验室保存.方法:将人体趋化岗子RANTES基因插入含AOXI启动子和α分泌信号肽序列的酵母表达载体pPICgK中,用Sal I将重组质粒线性化,电击转化毕赤酵母GS115感受态细胞,筛选阳性整合子进行甲醇诱导表达.主要观察指标:趋化因子RANTES在毕赤酵母中的表达、纯化与鉴定结果.结果:人体趋化因子RANTES在酵母培养基BMGY中实现了分泌表达,表达产物经SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳及Westem blot 鉴定为重组RANTES蛋白.结论:在毕赤酵母真核系统中实现了人体趋化因子RANTES的分泌表达,为RANTES蛋白进一步的结构和功能研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡宗利	重庆大学生物工程学院	53	641	12.0	24.0
2	陈国平	重庆大学生物工程学院	56	671	12.0	25.0
3	赵志平	重庆大学生物工程学院	6	17	3.0	4.0
4	张宁	重庆大学生物工程学院	14	257	6.0	14.0
5	邓晓洁	重庆大学生物工程学院	1	1	1.0	1.0