人肿瘤抑素Tumstatin基因慢病毒表达载体的构建及其蛋白表达

• 作者: 焦伊胜 王桂玲 王永来
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤抑素 慢病毒载体 转移,基因
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 18-20
• 页数: 3页
• 分类号: R73-35
• 字数: 3450字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2008.11.007

摘要

目的 构建Tumstatin基因慢病毒表达载体,进一步研究Tumstatin基因的功能及其在肿瘤治疗中的应用.方法 采用PCR技术从含有Tumstatin基因的质粒pSPORT1-Sfi扩增目的 基因Tumstatin,并将基因克隆到慢病毒载体表达质粒PGC-Fu[含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因]中,构建慢病毒载体表达质粒pGC-FU-Tum,通过酶切、测序验证Tumstatin基因后,将pGC-FU-Tum质粒和包装质粒pHelper1.0、pHelpe2.0共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,获得携带Tumstatin基因和EGFP基因的重组慢病毒GC-Fu-Tum,并转染人脐静脉血管内皮细胞HUVEC,Wstem blot检测目的 蛋白Tumstatin的表达.结果 pGC-FU-Tum中携有正确的Tumstatin基因;pGC-FUTurn共转染包装细胞293T能产生高浓度的重组慢病毒GC-FU-Tum;目的 基因Tumstatin能被重组慢病毒高效地转导入HUVEC,荧光显微镜下能直接观察到EGFP,Western blot能检测到Tumstatin蛋白在靶细胞中的表达.结论 成功构建了携带Tumstatin基因的重组慢病毒载体;其蛋白表达与EGFP-致..

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	焦伊胜		30	59	5.0	6.0
2	王永来		57	515	12.0	20.0
3	王桂玲		25	137	7.0	11.0