半胱氨酰白三烯受体2多克隆抗体制备及其鉴定

• 作者: 卢韵碧 史文珍 张丽慧 张咏梅 戚玲玲 方三华 沈建根 赵春贞 陈丽萍 魏尔清 鲍建芳
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 半胱氨酸/遗传 受体 白三烯/遗传 半胱氨酰白三烯受体 CysLT_2受体 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 591-597
• 页数: 7页
• 分类号: Q421
• 字数: 4739字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2009.06.007

摘要

目的:制备半胱氨酰白三烯受体2(CysLT_2)多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性及应用.方法:以KLH偶联的CysLT_2受体多肽免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性;同时,以新制备的抗体进行Western blot和免疫组化,检测CysLT_2受体的组织表达.结果:ELISA测定显示,获得的家兔抗CysLT_2受体抗体的效价大于1/1 047 296,对CysLT_2受体的特异性强,对CysLT_1受体和GPR17基本无交叉反应.Western blot结果显示,CysLT_2受体在大鼠、小鼠肾、脑和肺中有较高的表达,其分子量在40 kD左右.免疫组化结果表明,CysLT_2受体主要表达在大鼠神经元,也表达在部分星形胶质细胞.结论:制备的CysLT_2受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blot和免疫组化检测的要求.