少汗型外胚层发育不良症eda-A1基因突变分析及其真核表达载体的构建

• 作者: 何祥一 张琳 王锦明 车团结 邓旎 雷科
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 少汗型外胚层发育不良症 eda-A1基因 突变 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 610-613
• 页数: 4页
• 分类号: R781.6
• 字数: 2939字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1182.2009.06.008

摘要

目的 克隆少汗型外胚层发育不良症(HED)eda-A1基因并进行突变分析,同时构建eda-A1基因编码序列突变型(M)和野生型(W)的真核表达载体pcDNA3.1(-)-eda-A1-M/W,为进一步明析eda基因的功能奠定基础.方法 设计含有BamH Ⅰ和Hind Ⅲ的酶切位点的引物,从HED患者和正常人外周血淋巴细胞中提取总mRNA,利用RT-PCR法克隆eda-A1(M/W)基因cDNA序列;并运用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切pcDNA3.1(-)载体和eda-A1基因片段,将eda-A1(M/W)插入到pcDNA3.1(-)载体中,从而构建新的真核表达载体,命名为pcDNA3.1(-)-eda-A1-M和pcDNA3.1(-)-eda-A1-W.结果 成功克隆少汗型外胚层发育不良症eda-A1基因,并发现未见报道过的907位A→C错义突变,导致306位编码氨基酸由谷氨酰胺变异为脯氨酸;经PCR法、重组载体双酶切法、DNA测序验证,成功构建了pcDNA3.1(-)-eda-A1-W/M的真核表达载体.结论 成功构建少汗型外胚层发育不良症eda-A1基因(突变型和野生型)真核表达载体pcDNA3.1(-)-eda-A1-M/W,为进一步研究该基因在牙齿发育中的生物学作用奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何祥一	兰州大学口腔医院口腔修复科	43	118	7.0	7.0
2	张琳	兰州大学口腔医院口腔修复科	22	95	7.0	9.0
3	雷科	兰州大学口腔医院口腔修复科	8	30	3.0	5.0
4	王锦明		2	8	1.0	2.0
5	邓旎	兰州大学口腔医院口腔修复科	3	13	2.0	3.0