实时荧光RT-PCR在SARS病毒定量检测中的应用

• 作者: 冯艳铭 刘宁 李振勇
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: SARS冠状病毒 实时荧光定量 逆转录聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 87-89
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的 建立实时荧光定量PCR技术检测患者SARS病毒含量.方法 通过高效样品处理方法提取血清、漱口液中SARS-CoV RNA,采用简巢式PCR和TaqMan荧光探针标记技术检测SARS-CoV核酸,阳性扩增产物制备重组质粒,重组质粒系列稀释后标定作为定量标准曲线.结果 本法具有很好的特异性、重复性,灵敏度达到1×105 copies/L.132例漱口液标本中,40例SARS患者SARS-CoV核酸的检出率为65%(26/40),疑似病人检出率为11.5%(6/52),40例健康人均未检出;39例SARS患者的血清标本中SARS-COV核酸检出率为25.6%(10/39),3例疑似病人血清均未检出.对52例疑似病人漱口液阳性的6例样本的基因扩增产物进行测序确认,与BJ01 AY278488标准序列一致,检测结果与临床表现基本相符.结论 本法快速、特异,适用于临床样本中SARS冠状病毒的检测,同时为滴度低、取样困难的病原体的检测探索了一种新的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯艳铭		19	59	4.0	6.0
2	刘宁		14	15	3.0	3.0
3	李振勇		2	33	1.0	2.0