重组人白介素-22生物学活性检测方法研究

• 作者: 傅强 张军要 李晓颖 许飞 邢瑞青 黄予良 黄智华
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 白介素-22正交实验 报告基因 萤光素酶
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 162-165
• 页数: 4页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3665字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2009.01.039

摘要

目的 建立重组人白介索-22(IL-22)生物学活性的检测方法.方法 将pSTAT3-TA-Luc质粒与pcDNA3.1质粒共转染HepG2细胞,经G418筛选出稳定转染的HepG2/STAT3细胞株.用重组人IL-22刺激细胞,定量检测荧光强度确定IL-22的活性.通过正交实验确定最佳检测条件,观察此方法的重复性和特异性,并进行方法对比.结果 最佳检测条件为细胞密度4×105/mL,加重组人IL-22刺激4h.加入萤光素酶底物50μL.本方法检测结果为半数有效量(ED50)=16.89 ng/mL,变异系数(RSD)=7.09%.中和抗体实验证实其特异性好.与ELISA法比较.该方法稳定性更好,耗时少且价格更便宜.结论 选择萤光素酶为报告基因,将报告基因的检测与细胞的转录诱导机制相结合,构建了生物活性检测细胞株,建立了IL-22活性检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄智华		2	13	2.0	2.0
2	黄予良		2	13	2.0	2.0
3	许飞	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室	7	11	3.0	3.0
4	邢瑞青	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室	3	8	2.0	2.0
5	李晓颖	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室	3	8	2.0	2.0
6	张军要	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室	1	5	1.0	1.0