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摘要:
利用RT-PCR反应,从纹枯菌诱导的水稻叶片cDNA中克隆了1个水稻几丁质酶基因RC7的全长编码序列(ORF).通过亚克隆方法,RC7与原核表达载体pGEX-4T-1上的GST融合,构建成GST-RC7重组蛋白的原核表达载体pGST-RC7,然后,将其转化到大肠杆菌细胞中.经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了以包涵体形式高效表达的GST-RC7.经过洗涤、溶解(变性)、复性及纯化等处理,包涵体中GST-RC7蛋白得到溶解、复性和纯化.纯化的复性GST-RC7蛋白具有几丁质酶活性.对6种重要作物病原真菌进行体外抑菌活性分析的结果表明,RC7可显著抑制水稻纹枯病菌、小麦纹枯菌、小麦赤霉菌、棉花黄萎菌、烟草赤星菌的菌丝生长,说明RC7可作为上述植物病害抗性基因育种的重要基因.
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文献信息
篇名 水稻几丁质酶的原核表达、复性及体外抑菌活性的研究
来源期刊 核农学报 学科 农学
关键词 水稻几丁质酶基因 表达 蛋白质纯化 复性 体外抑制真菌活性
年,卷(期) 2009,(3) 所属期刊栏目 植物诱变育种·农业生物技术
研究方向 页码范围 369-374
页数 6页 分类号 S5
字数 语种 中文
DOI
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序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 梁国鲁 西南大学园艺园林学院 168 1619 20.0 30.0
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研究主题发展历程
节点文献
水稻几丁质酶基因
表达
蛋白质纯化
复性
体外抑制真菌活性
研究起点
研究来源
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相关学者/机构
期刊影响力
核农学报
月刊
1000-8551
11-2265/S
16开
北京市海淀区圆明园西路2号农产品加工研究所
1987
chi
出版文献量(篇)
4988
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