对美国白蛾几丁质脱乙酰酶(hccda5)基因原核表达影响因素的研究

• 作者: 孙晓彤 李少雅 李瑞军 赵丹 郭巍 陆秀君
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 美国白蛾 hccda5 原核表达 影响因素
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 页码范围: 81-85,91
• 页数: 6页
• 分类号: S433.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2015.0089

摘要

为探究影响美国白蛾几丁质脱乙酰酶(hccda5)基因在原核细胞中表达的因素,以pMD19-T-hccda5重组质粒为模板,通过PCR技术获得hccda5基因全长,与载体连接并转化BL21(DE3)构建工程菌,探索载体、IPTG浓度、培养温度、诱导时间等条件对目的蛋白表达的影响.结果表明:pET28a-hccda5在16 C诱导过夜时,目的蛋白表达量大,载体种类对基因表达有一定影响;IPTG浓度和温度对目的基因表达基本无影响;诱导时间在不同温度条件下对基因表达影响不同.本研究成功构建了hccda5基因工程菌,实现了其在原核细胞中的表达,初步确定了影响其表达的因素,为真核基因在原核细胞中的表达提供了实验依据.