DNA聚合酶适配子6-10提高定量PCR的特异性

• 作者: 刘峰涛 柴立辉 马远方
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 适配子 DNA聚合酶 热启动PCR 定量PCR
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 164-166
• 页数: 3页
• 分类号: Q503
• 语种: 中文

摘要

目的 利用DNA聚合酶适配子6-10进行热启动定量PCR,提高定量PCR的检测灵敏度.方法 适配子6-10组、抗体对照组和非热启动对照组分别进行定量PCR,制作标准曲线,以复相关系数(r2)大于0.99为线性范围,比较其线性范围下限.结果 非热启动定量PCR对人死亡受体5(death receptor 5,DR5)的检测线性范围下限为105拷贝/μl,而适配子6-10(200nmoL/L)与抗DNA聚合酶抗体方法对DR5的检测线性范围下限为103拷贝/μl.熔解曲线分析表明,在扩增高浓度靶分子(105拷贝/μl)时,各种方法非特异扩增均不明显,没有形成非特异峰;在扩增低浓度靶分子(103拷贝/μl)时,非热启动对照组的非特异扩增明显,产生明显的非特异峰,而DNA聚合酶适配子6-10可以明显消除非特异扩增形成的非特异峰.结论 DNA聚合酶适配子6-10可以提高定量PCR的检测灵敏度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马远方		121	553	13.0	16.0
2	柴立辉		20	93	5.0	9.0
3	刘峰涛		15	22	2.0	4.0