猪瘟病毒荧光定量PCR标准阳性模板的构建

• 作者: 姚建红 戴贤君 陆永干 黄利权
• 来源期刊: 浙江农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 荧光定量PCR 重组质粒
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 35-38
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65|Q78
• 字数: 2972字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1524.2009.01.008

摘要

设计扩增猪瘟病毒(swine fever virus,SFV)核酸5'端非翻译区的引物,采用RT-PCR方法克隆目的片段并插入PMD-18 simple T质粒,重组质粒转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,提取质粒经PCR和序列测定证实为阳性重组质粒,命名为pSF.将构建的pSF作为标准阳性模板进行荧光定量PCR(FQ-PCR)检测表明,此模板在-20℃保存6个月对结果无显著影响;对于1×109,1×107,1×105拷贝/2μl的pSF用FQ-PCR方法测定的Ct值最大变异系数分别为1.55%;使用该模板建立的定量范围为1×102～1×1011拷贝/2μl;构建的阳性重组质粒pSF具有良好的稳定性和特异性.该方法可以用于临床诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄利权	浙江大学动物科学学院	47	431	12.0	20.0
2	姚建红		5	23	3.0	4.0
3	陆永干	浙江大学动物科学学院	6	52	3.0	6.0
5	戴贤君	中国计量学院生命科学学院	49	176	7.0	10.0