棒状链霉菌蛋白质样品提取方法及双向凝胶电泳条件的优化

• 作者: 冯涛 夏月兰 张嗣良 王永红 王美龙 银鹏
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: 棒状链霉菌 双向电泳 蛋白质组学
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 分离纯化与化学合成
• 页码范围: 609-616
• 页数: 8页
• 分类号: Q935|Q51
• 语种: 中文

摘要

针对基于工业用复合培养基的棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)发酵液杂质含量高特性,对蛋白质样品制备、第一向等电聚焦和第二向SDS-PAGE电泳相关的主要实验条件进行了研究和优化.所得最适条件为:采用液氮研磨方法破碎细胞,用10%的TCA/丙酮沉淀法除盐,用含有7mol/L尿素,2mol/L硫脲,2%CHAPS,20mmol/L DTT,0.5%IPG缓冲液(pH3～10)的溶胀液重悬蛋白,应用pH梯度为4～7,长度为24cm的固定化胶条进行第一向等电聚焦,浓度为12.5%的聚丙烯酰胺凝胶进行第二向SDS-PAGE,考马斯亮蓝R-250染色,上样最为600μg.对获得的双向电泳图像运用Image Master 2D Platinum软件进行分析表明成功建立了重复性好的基于复合培养基的棒状链霉菌蛋白质样品制备和双向电泳方法,为工业规模克拉维酸发酵过程蛋白质组研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张嗣良	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	238	2388	24.0	36.0
2	王永红	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	87	634	13.0	20.0
3	冯涛	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	4	16	2.0	4.0
4	王美龙	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
5	银鹏	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
6	夏月兰	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	3	8	2.0	2.0