猪繁殖与呼吸综合征病毒兰州分离株ORF3基因的克隆及杆状病毒载体的构建

• 作者: 何生虎 刘湘涛 吴锦艳 尚佑军 满自萍 田宏 祁燕蓉 赵娜
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF3基因 克隆 杆状病毒表达载体
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: S858.28
• 字数: 3562字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1389.2009.03.001

摘要

根据猪繁殖与呼吸综合症病毒已知序列(ch-1a,AY032626)设计包含完整ORF3序列的1对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSV甘肃Lanzhou株的ORF3基因,将其克隆到杆状病毒载体pFastBacHTA上,经酶切鉴定、PCR鉴定筛选出阳性重组转移载体pFastBacHTA-ORF3,并对阳性质粒进行测序及序列分析;将pFastBacHTA-ORF3转化到DH10Bac感受态细胞中,与Bacmid发生位点特异性转座作用,获得重组转座子rBacmid-ORF3.成功构建了PRRSV Lanzhou株ORF3基因的杆状病毒载体,为基因工程疫苗的研制奠定了基础.