变铅青链霉菌异柠檬酸脱氢酶的异源表达及序列分析

• 作者: 刘爱民 张贝贝 徐琴 朱国萍 郝家胜 黄恩启
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 变铅青链霉菌 异柠檬酸脱氢酶 活性 辅酶特异性 单体 同源二聚体
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 771-776
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 3662字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2009.06.013

摘要

通过同源性引物成功扩增和克隆了变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)TK54的异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase, IDH) (简称SlIDH)基因icd (GenBank登录号为EU661252).icd的起始密码子为GTG,GC含量为69.55 %,显示了链霉菌基因的高GC含量特征,实现了SlIDH在E.coli中的异源高效表达.0.5 mmol/L的IPTG为最佳诱导条件.SlIDH的分子量约为80 kD.在Mn~(2+)或Mg~(2+)条件下,SlIDH以NADP~+为辅酶时的活性分别为7.94 U/mg及4.00 U/mg,以NAD~+为辅酶时的活性分别为0.58 U/mg及0.27 U/mg,SlIDH更偏爱以NADP~+为辅酶.与不同种属单体IDH的氨基酸序列比对显示,SlIDH与单体IDH的序列一致性均在60 %以上.因此本工作首次以实验性证据初步鉴定了SlIDH为NADP-依赖型单体IDH.本工作为进一步探索单体IDH的结构与功能以及单体IDH与同源二聚体IDH的进化关系奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝家胜	安徽师范大学分子进化与生物多样性重点实验室	41	568	13.0	22.0
5	黄恩启	安徽师范大学分子进化与生物多样性重点实验室	3	40	2.0	3.0
6	刘爱民	安徽师范大学分子生物学及生物技术研究所	25	384	9.0	19.0
7	张贝贝	安徽师范大学分子进化与生物多样性重点实验室	6	21	2.0	4.0
8	徐琴	安徽师范大学分子进化与生物多样性重点实验室	2	1	1.0	1.0