bcl-2 RNAi表达载体的构建、鉴定及其对Raji细胞的干扰效果

• 作者: 冯萍 宋妙丽 申咏梅 秦陈浩
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: RNAi bcl-2 B细胞淋巴瘤 Raji细胞 pGenesil-1载体
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 406-410
• 页数: 5页
• 分类号: R733|Q784
• 语种: 中文

摘要

目的 构建bcl-2特异性RNAi真核细胞质粒表达载体,并研究其对B细胞淋巴瘤Raji细胞的干扰效果.方法 根据GenBank提供的bcl-2 cDNA序列,设计并合成两对短发夹结构的互补DNA序列,经退火形成互补双链,克隆至载体pGenensil-1构建重组质粒,予以酶切和DNA测序鉴定.脂质体介导重组质粒转染Raji细胞,采用RT-PCR法观察重组质粒对bcl-2 mRNA表达的影响,流式细胞仪测定细胞凋亡.结果 酶切及测序鉴定表明,成功构建bcl-2 shRNA的质粒表达载体pGenesil-1-bcl-2-544和pGenesil-1-bci-2-1009.转染Raji细胞48 h后,RT-PCR结果显示Raji细胞中bcl-2 mRNA表达分别下调了(31.95±3.02)%和(47.57±2.88)%,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示Raji细胞凋亡率分别为(14.25±0.84)%和(11.96±0.79)%,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建bcl-2特异性RNAi真核细胞质粒表达载体,它能有效沉默bcl-2基因在B细胞淋巴瘤中的表达并促进B细胞淋巴瘤Raji细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	申咏梅	苏州大学附属第二医院放射免疫中心	33	139	7.0	9.0
2	冯萍	苏州大学附属第二医院检验科	65	400	11.0	18.0
3	秦陈浩	苏州大学附属第二医院检验科	12	21	2.0	4.0
4	宋妙丽	苏州大学附属第二医院放射免疫中心	3	15	2.0	3.0