脂质体介导pAcGFP-bFADD重组质粒转染Hela细胞条件的优化

• 作者: 张路培 李俊雅 李武峰 杨润军 许尚忠 陈金宝 高雪
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 转染 lipofectamine 2000 重组质粒 Hela细胞
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 786-791
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 字数: 4588字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.05.008

摘要

用脂质体lipofectamine 2000介导携带有AcGFP报告基因的pAcGFP-bFADD质粒转染Hela细胞,并通过调整质粒DNA、脂质体的浓度及转染时间来优化转染条件,转染后12 h在荧光显微镜下计数阳性细胞,MTT法检测各转染条件下Hela细胞的活性.结果表明,将2.4μg的pAcGFP-bFADD质粒与3.0μL lipofectamine 2000制备转染复合物与Hela细胞作用6 h可以获得62.3%的转染效率,并且保持较高的细胞存活率(83%).当质粒DNA与脂质体的量增加至3.2μg和6.0μL时,转染复合物对细胞的毒性作用明显增强,对细胞的抑制率可达42.98%,与对照组相比,差异极显著(P<0.01);条件优化后AcGFP-bFADD融合基因于转染后72 h达到表达高峰,绿色荧光阳性细胞所占比率达到64%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高雪	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	89	774	17.0	23.0
2	李俊雅	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	62	320	10.0	14.0
3	许尚忠	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	141	1290	19.0	28.0
5	杨润军	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	7	38	4.0	6.0
11	张路培	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	21	142	7.0	11.0
12	李武峰	山西农业大学生命科学院	20	228	7.0	15.0