细粒棘球绦虫成虫表膜抗原特异性基因的筛选及克隆

• 作者: 古努尔·吐尔逊 吐尔洪·依米提 巫剑 张壮志 张文宝 易忠 石保新 米晓云 赵莉 雷震
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 细粒棘球绦虫 Eg成虫表膜抗原 Eg成虫cDNA文库 免疫筛选 序列分析
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 寄生虫
• 页码范围: 47-51
• 页数: 5页
• 分类号: S852.734
• 字数: 3338字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2009.04.010

摘要

为筛选细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)表膜抗原基因或具有诊断性的特异性基因,提取Eg成虫表膜抗原,经ELISA、Western blot对该抗原的免疫学特性进行初步研究.以Eg成虫表膜抗原高免鼠血清为探针,筛选Eg成虫cDNA文库,将阳性噬菌斑的PCR产物和pGEM-T载体连接,转染到DH5α,对得到的重组子进行测序,并进行同源性分析.ELISA检测显示,表膜抗原免疫鼠诱导产生了特异性抗体,Westem blot鉴定该抗体能识别Eg成虫表膜抗原、原头蚴、Eg发育不成熟、Eg发育成熟抗原.筛选出6个阳性克隆,DNA片段大小在1～2kb之间.对阳性克隆进行同源性分析,结果与EgP-29mRNA同源性为99%,与Eg14-3-3蛋白mRNA同源性80%-99%.筛选Eg成虫cDNA文库所获得的基因,证明了Eg虫体表膜抗原的存在,有望成为犬细粒棘球绦虫的诊断抗原以及犬抗细粒棘球绦虫的候选基因.