牛病毒性腹泻病毒E2基因在毕赤酵母GS115中的表达与鉴定

• 作者: 左玉柱 杨汉春 王安忠 秦建华 范京惠 赵月兰
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 E2基因 毕赤酵母 分泌型表达
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1255-1259
• 页数: 5页
• 分类号: S852.85
• 语种: 中文

摘要

将牛病毒性腹泻病毒(BVDV)河北分离株HB-bd毒株E2基因去除跨膜区获得sE2基因,将sE2基因克隆入巴斯德毕赤酵母(P.Pastoris)分泌型表达载体pPIC9K中,筛选培养后提取阳性重组质粒,经酶切和PCR鉴定,命名为pPIC9K-sE2.重组质粒pPIC9K-sE2经Sal Ⅰ酶切线性化,电穿孔导入P.Pastoris GS115基因进行整合,使外源基因sE2稳定地整合到P.Pastoris染色体中,G418筛选得到阳性高拷贝转化子GS115-pPIC9K-sE2.经甲醇诱导表达后,sE2融合蛋白获得了表达,表达产物经SDS-PAGE、Western-blot和Dot-ELISA分析,确定其表达的sE2融合蛋白相对分子质量大小为37 000,且具有天然蛋白的抗原特异性.免疫原性研究证明P.Pastoris表达的sE2蛋白能刺激动物产生特异抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨汉春	中国农业大学动物医学院	277	4554	34.0	54.0
2	赵月兰	河北农业大学中兽医学院	60	297	11.0	15.0
3	秦建华	河北农业大学动物科技学院	172	899	15.0	20.0
4	王安忠	河北农业大学中兽医学院	16	35	4.0	5.0
5	范京惠	河北农业大学动物科技学院	56	237	9.0	13.0
6	左玉柱	河北农业大学动物科技学院	86	419	10.0	17.0