单纯疱疹病毒Ⅱ型潜伏相关转录体基因ORF真核表达载体的构建及表达

• 来源期刊: 中国皮肤性病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单纯疱疹病毒Ⅱ型 潜伏相关转录体 蛋白读码框 真核表达
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 721-723
• 页数: 3页
• 分类号: R373|R392.2
• 字数: 2514字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建单纯疱疹病毒Ⅱ型潜伏相关转录体基因ORF片段真核表达载体,并在Vero细胞中进行表达. 方法用PCR方法从已成功构建的pVAX-LAT重组质粒中扩增潜伏相关转录体基因ORF片段,克隆到pcDNA 6/myc-his B质粒中,构建pcDNA-ORF重组质粒,双酶切及测序鉴定其正确性.以脂质体法瞬时转染Vero细胞,并用RT-PCR和Western blot检测其表达. 结果双酶切及测序表明ORF片段大小及序列均正确,RT-PCR及Western blot显示重组质粒在Vero细胞中得到了表达. 结论成功构建了pcDNA-ORF重组质粒,并可在Vero细胞内有效表达.