人重组阿片受体样受体在CHO细胞稳定表达系统的建立

• 作者: 宫泽辉 李玉蕾 李素燕 温泉 颜玲娣
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 阿片受体样受体 CHO细胞 转染 放射性配体-受体结合
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 409-411,485
• 页数: 4页
• 分类号: R962|R996
• 字数: 3532字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2009.05.003

摘要

目的:在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上稳定转染人重组阿片受体样受体(hORL1),为体外高通量筛选hORL1受体作用药物及相关药物分子机制研究奠定基础.方法:用脂质体介导法将pcDNA3.1(+)-hORL1重组质粒稳定转染到缺乏hORL1的CHO细胞中,然后用含G418的选择性培养液进行筛选,挑取耐药克隆;用放射性配体-受体结合实验进一步筛选阳性克隆,对阳性克隆受体亲和力和表达量进行分析,用[35S]GTPγS结合实验分析表达受体的功能.结果与结论:在稳定转染hORL1的克隆细胞中,[3H]伤害感受肽的Kd和Bmax值分别为(0.44±0.21)nmol/L和(0.35±0.06)pmol/mg蛋白.伤害感受肽刺激受体结合[35S]GTPγS的EC50值为3.45 nmol/L.以上结果与文献报道的天然hORL1受体的特性相似,说明该细胞株表达的hORL1受体与天然的hORL1受体具有基本一致的生物学特性,证实成功建立了稳定表达人阿片受体样受体的细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宫泽辉	军事医学科学院毒物药物研究所	96	528	12.0	18.0
2	颜玲娣	军事医学科学院毒物药物研究所	28	138	6.0	9.0
3	温泉	军事医学科学院毒物药物研究所	8	37	4.0	5.0
4	李玉蕾	军事医学科学院毒物药物研究所	5	8	2.0	2.0
5	李素燕	军事医学科学院毒物药物研究所	5	85	3.0	5.0