兔出血症病毒衣壳蛋白重组腺病毒的构建、表达及其免疫原性

• 作者: 何孔旺 张则斌 徐为中 王芳 秦爱建 胡波 范志宇 薛家宾
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 兔出血症病毒 重组腺病毒 表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 1320-1324
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3845字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2009.06.025

摘要

通过RT-PCR方法扩增上海地区兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白基因(VP60).将其克隆入腺病毒表达载体系统中,构建成重组腺病毒质粒,用脂质体法转染HEK293细胞,得到重组病毒pAd-VP60,经RT-PCR、IFA、HA、SDS-PAGE和Western-blotting鉴定,结果表明重组VP60蛋白在HEK293细胞中获得表达.表达产物与铝胶佐剂混合后注射3月龄非免疫健康家兔,结果表明,免疫后21 d兔体内产生抗RHDV抗体,其HI效价可达2~6～2~7,能抵御HA≥2~(10)致死剂量RHDV强毒的攻击,保护率为100%.