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摘要:
目的 构建Ⅱ型神经纤维瘤(NF2)抑癌基因546位点突变的真核表达载体,并在大鼠神经鞘瘤细胞(RT4)中诱导表达.方法 用定点突变法将pEGFP-N1-NF2第546位异亮氨酸(Ⅱe)突变为蛋氨酸(Met)从而构建NF2突变子pEGFP-N1-NF2~(△Ⅱe546Met),经酶切和测序鉴定后用脂质体法将其转染至RT4细胞,同时设pEGFP-N1-NF2转染组做为对照,Westem blot法检测细胞pEGFP-NF2蛋白的表达,MTT法检测转染后细胞的增殖情况. 结果 酶切测序证实定点突变成功,Western blot结果显示RT4细胞能表达pEGFP-NF2蛋白,pEGFP-N1-NF2~(△Ⅱe546Met)转染组RT4细胞抑制率低于pEGFP-N1-NF2转染组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建了1个能够在RT4细胞中表达的单个点突变的NF2基因真核表达载体.
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文献信息
篇名 Ⅱ型神经纤维瘤基因突变型的构建及生物学功能研究
来源期刊 中华神经医学杂志 学科 医学
关键词 定点突变 真核表达载体 Ⅱ型神经纤维瘤 抑癌基因 神经鞘瘤细胞
年,卷(期) 2009,(12) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 1189-1192
页数 4页 分类号 R596
字数 3033字 语种 中文
DOI 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2009.12.001
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 卢亦成 第二军医大学长征医院神经外科 242 1130 13.0 23.0
2 卞留贯 上海交通大学医学院附属瑞金医院神经外科 67 288 8.0 14.0
3 孙青芳 上海交通大学医学院附属瑞金医院神经外科 74 242 7.0 12.0
4 沈建康 上海交通大学医学院附属瑞金医院神经外科 58 404 11.0 18.0
5 赵建祥 上海交通大学医学院附属瑞金医院神经外科 6 22 3.0 4.0
6 贺华 第二军医大学长征医院神经外科 9 41 4.0 6.0
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研究主题发展历程
节点文献
定点突变
真核表达载体
Ⅱ型神经纤维瘤
抑癌基因
神经鞘瘤细胞
研究起点
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期刊影响力
中华神经医学杂志
月刊
1671-8925
11-5354/R
大16开
广州市海珠区工业大道中253号珠江医院
46-251
2002
chi
出版文献量(篇)
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