慢病毒介导shRNA特异性沉默livin基因促进SPC-A1细胞凋亡

• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺肿瘤 livin基因 RNA干扰 慢病毒载体 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 469-473
• 页数: 5页
• 分类号: R734.2|R730.54
• 字数: 3809字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2009.05.009

摘要

目的:建立慢病毒介导的livin基因沉默系统,探讨其对肺癌细胞凋亡的影响.方法:Livin shRNA慢病毒感染肺腺癌细胞株SPC-A1沉默livin基因表达.应用PI染色经荧光镜下观察SPC-A1细胞凋亡形态,流式细胞术检测SPC-A1细胞凋亡率及亚二倍体峰形成,Real-time PCR及Western blotting方法检测livin和caspase 3表达的改变.结果:livin基因在肺腺癌细胞株SPC-A1中持续高表达.经慢病毒介导shRNA使livin基因表达沉默后,镜下可见肺腺癌细胞出现典型凋亡形态特征,流式细胞术检测出现亚二倍体峰,细胞凋亡率较空白对照及阴性病毒对照细胞明显增加(8.21% vs 0.08%, 0.13%;P<0.05),RT-PCR及Western blotting 检测结果显示,caspase 3 mRNA表达无改变,但cleaved-caspase 3蛋白表达上调.结论:慢病毒载体介导的shRNA能抑制肺腺癌细胞株SPC-A1中livin基因的表达,从而促进SPC-A1细胞凋亡.