改进重叠延伸法引入DNA定点突变的新方法

• 作者: 尚利梅 延晋雷 张璇 杨方 武慧婧 裴鑫 赵偲宇 郝小惠 郭志义
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 定点突变 重叠延伸PCR 高GC含量
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 34-36
• 页数: 3页
• 分类号: Q784
• 字数: 2709字
• 语种: 中文

摘要

目的:改进重叠延伸PCR法,实现一种引入DNA定点突变的准确简便方法.方法:通过应用不同的扩增酶和反应体系,以重叠延伸PCR的方法产生引入突变位点的DNA片断,然后再亚克隆到载体中.该文以人cyclin D1启动子的NF-κB位点(-39/-30)为例.结果:通过DNA测序证明定点突变成功引入.一次引入4个突变碱基.突变引入率为100%.