利用重叠延伸PCR技术进行定点突变研究

• 作者: 王玉炯 王盛 雒丽娜
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 重叠延伸PCR技术 定点突变 rPA基因
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 5779-5781
• 分类号: S126|Q936
• 字数: 3057字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2012.10.022

摘要

[目的]建立一种高效、便捷、经济的DNA定点突变方法.[方法]以重组人组织型纤溶酶原激活剂rPA(Reteplase)基因为模板,采用重叠延伸PCR技术对3个位点进行定点突变,将突变基因片段克隆到克隆载体pEASY - Blunt上,并通过测序验证突变结果.[结果]测序结果表明3个位点的突变结果与预期完全一致,即第10位引入单个碱基A、第137位碱基C突变为G以及第686位碱基G突变为A,通过重叠延伸PCR技术一次引入3个突变碱基,100％的实现目的位点的定点突变.[结论]该研究成功实现目的位点的定点突变,为rPA基因的进一步克隆和功能研究奠定了基础.同时也表明重叠延伸PCR技术是一种高效、便捷、经济的DNA定点突变方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王玉炯	宁夏大学生命科学学院	108	671	13.0	20.0
5	王盛	宁夏大学生命科学学院	18	57	4.0	7.0
7	雒丽娜	宁夏大学生命科学学院	5	36	3.0	5.0