PCR技术对Wilson病基因进行定点突变的研究

• 作者: Toshihiro Sugiyama 侯国庆 杨春水 梁秀龄 王莹 闫振文
• 来源期刊: 中山医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肝豆状核变性/遗传学 聚合酶链反应 定点诱变
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 94-96
• 页数: 3页
• 分类号: R742.4
• 字数: 3006字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2002.02.005

摘要

[目的] 利用聚合酶链反应(PCR)技术对Wilson病(WD)基因进行体外定点突变的研究.[方法] 采用PCR定点突变技术,首先设计两对引物,将突变位点设计在引物上,通过重叠延伸法两次PCR扩增,扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩增片段克隆入pRc/CMV载体中.[结果] DNA测序表明在预期位点已经发生突变,WD基因第778位密码子由精氨酸(Arg)残基突变为亮氨酸残基(Leu),用PCR定点突变技术成功构建Wilson病基因突变体.[结论] PCR技术诱导定点突变准确、高效.Wilson病基因突变体的构建成功,为进一步研究该突变位点导致Wilson病的发病机制和Wilson病蛋白的结构和功能的关系奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁秀龄	中山医科大学附属第一医院神经内科	42	355	11.0	16.0
2	王莹	中山医科大学附属第一医院神经内科	13	117	7.0	10.0
3	侯国庆	中山医科大学附属第一医院神经内科	5	66	5.0	5.0
4	杨春水	中山医科大学附属第一医院神经内科	6	47	5.0	6.0
5	闫振文	中山医科大学附属第一医院神经内科	8	50	5.0	6.0
6	Toshihiro Sugiyama	中山医科大学附属第一医院神经内科	1	13	1.0	1.0