重叠延伸PCR法构建小鼠Sumf1基因的定点突变真核表达载体

• 作者: 周畅 帅勇 易朵 王成 胡兴旺 赵晓蒙
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 转录因子AP-2α 硫酸酯酶修饰因子Sumf1 重叠延伸PCR 定点诱变
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 430-436
• 页数: 7页
• 分类号: Q955
• 字数: 4961字
• 语种: 中文

摘要

前期通过染色质免疲沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay,CHIP)筛选出了转录因子activator protein-2 alpha(AP-2α)的靶基因Sumf1.采用重叠延伸PCR定点诱变技术,对AP-2α在Sumf1内含子片段上的两个结合位点的碱基进行定点突变,并构建定点突变表达载体.DNA测序表明,Sumf1内含子片段103～111 bp.411～419 bp两处的碱基已分别由GGGGTCAGG突变为GAAGTCCTG,由GCCTCTAGG突变为GGATCTCTG,成功实现定点诱变,为进一步研究AP-2α对基因Sumf1的表达调控奠定了基础.