IGF-1毛囊特异表达载体的构建以及转染绒山羊胎儿成纤维细胞的研究

• 作者: 宝明涛 尹俊 旭日干 杨东山 毛舒燕 郭旭东
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绒山羊 胰岛素样生长因子1 红色荧光蛋白 毛囊细胞 胎儿成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1460-1467
• 页数: 8页
• 分类号: S827|Q78
• 字数: 5987字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在构建绵羊胰岛素样生长因子1(IGF-1)毛囊特异表达载体pCDsR-KI,并转染绒山羊胎儿成纤维细胞,最终获得稳定表达红色荧光并可用于核移植的转基因细胞克隆.通过RT-PCR方法获得IGF-1 cDNA,其与KAP6-1基因启动子片段以及红色荧光蛋白表达元件连接构成IGF-1毛囊特异表达载体pCDsR-KI(大小7.4 kb).以组织块贴附法分离和培养绒山羊胎儿成纤维细胞,外源性表达载体以lipofectamineTM 2000介导转染所培养的第2代成纤维细胞,在DMEM/F12+10%FBS、37℃、5%CO2中培养,并添加G418筛选,获得了表达红色荧光蛋白的细胞克隆.经PCR法鉴定证实外源基因已经整合在细胞基因组中.通过分析转基因体细胞的生长曲线和染色体核型证明转基因细胞的生长状态良好、各项参数趋于正常.为下一步通过体细胞核移植技术获得转基因克隆绒山羊准备了核供体细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	旭日干	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	81	786	15.0	24.0
2	尹俊	内蒙古农业大学生物工程学院	84	844	15.0	26.0
3	郭旭东	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	16	155	6.0	12.0
4	杨东山	中国科学院广州生物医药与健康研究院	3	29	1.0	3.0
5	毛舒燕	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	4	52	3.0	4.0
6	宝明涛	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	3	45	2.0	3.0