利用酵母双杂交系统筛选Pak4相互作用蛋白质

• 作者: 吴怡 李丰 李丹妮 李彦姝 李晓东
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Pak4 酵母双杂交 信号转导
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 8-10,14
• 页数: 4页
• 分类号: Q257
• 字数: 2579字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2009.01.003

摘要

目的 利用酵母双杂交系统从人胎脑cDNA文库中筛选信号转导分子Pak4相互作用蛋白.方法 将Pak4激酶域序列克隆到酵母表达载体pGBKT7构建诱饵质粒.质粒转化到酵母感受态AH109和Y187中验证蛋白表达.将人胎脑cDNA文库转化酵母Y187,与已转化诱饵质粒的AH109酵母进行交配实验.交配子在SD/-Leu/-Trp/-His和SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade/X-α-gal平板上筛选,阳性克隆质粒酶切鉴定.结果 成功构建了pGBKT7-Pak4 KD诱饵质粒,Western blot证实其在酵母菌AH109和Y187中表达,筛选了多个与Pak4相互作用的阳性转化子.结论 利用酵母双杂交系统筛选出Pak4相互作用蛋白质.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴怡	沈阳医学院病原生物学教研室	26	78	6.0	7.0